Hydrophobic Interaction

疏水作用色谱法

在疏水作用色谱法(HIC)中,弱非极性固定相与高浓度的盐的水溶液同时使用。该方法主要通过减少盐的浓度来分离蛋白。

在反相色谱中,蛋白通过与填料上烷基或芳基相互作用保留下来。

不同于反相色谱,在疏水反应色谱中上述官能团的密度较低,且蛋白分子只在一个或少数几个位置上吸附。

盐浓度较高时会产生吸附作用,但若加入低百分比浓度的有机溶剂降低盐浓度,则会产生脱附作用。

尽管二者均以疏水作用为基础,但HIC分离的选择性明显不同于反相LC。

相对于RPC,HIC的最高容量较低,但其优势在于:流动相条件(主要是含水流动相)通常不会破坏高阶蛋白质结构。

TSKgel HIC 色谱柱

TSKgel HIC 色谱柱由三种从低到高不同疏水性的配体(丁基、醚和苯基)键合在聚甲基丙烯酸酯上的填料组成的。

醚柱与苯基柱所用的聚甲基丙烯酸酯基树脂是一种多孔材料,孔径大小为1000A,排阻限为1,000,000道尔顿,能提供高载量与高上样量。TSKgel Butyl-NPR具有无孔基质。在该基质上,只有颗粒表面能进行吸附。较短的运行时间和良好的回收率使丁基柱成为高通量或QC分析的最佳选择。三种柱类型之间的比较请详见下图。

图 1. 常规HIC柱和无孔HIC柱的比较

 

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粒径 (平均):       
 10,13,20 µm      
孔径 (平均):
 100 nm
pH 范围:  2.0 - 12.0
官能团:  Phenyl  

货号
产品名称
粒径
柱身材质 内径(mm) 长度(cm)
0013063
TSKgel Phenyl-5PW
10 µm
Glass 5  5
0008804
TSKgel Phenyl-5PW
10 µm
Glass 8 7.5
0008808
Guardgel Kit for P/N  0008804
 

Glass

0018759
TSKgel Phenyl-5PW
10 µm
Stainless Steel 2 7.5
0007573
TSKgel Phenyl-5PW
10 µm
Stainless Steel 7.5 7.5
0007652
Guardgel Kit for P/N  0007573
 
Stainless Steel

0007656
TSKgel Phenyl-5PW
13 µm
Stainless Steel 21.5 15
0016095
Guardgel Kit for P/N 0007656   Stainless Steel    
0020023
TSKgel BioAssist Phenyl
10 µm
PEEK  7.8 5

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粒径 (平均):            10 µm                  
孔径 (平均):     100 nm
pH 范围:     2.0 - 12.0
官能团:     Ether  

货号
产品名称
粒径
柱身材质 内径 (mm) 长度 (cm)
0014013
TSKgel Ether-5PW
10 µm
Glass 5 5
0014014
TSKgel Ether-5PW
10 µm
Glass 8 7.5
0014025
Guardgel Kit for P/N 0014014 Glass
0018760
TSKgel Ether 5PW        
10 µm
Stainless Steel 2 7.5 
0008641
TSKgel Ether-5PW
10 µm
Stainless Steel 7.5 7.5
0008643
Guardgel Kit for P/N 0008641 Stainless Steel
0008642
TSKgel Ether-5PW  13 µm Stainless Steel 21.5 15
0016091
Guardgel Kit for P/N 0008642
  Stainless Steel    

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粒径 (平均):      2.5 µm                  
孔径 (平均):            无孔
pH 范围:    2.0 - 12.0
官能团:    Butyl

货号
产品名称
粒径
柱身材质 内径 (mm) 长度 (cm)
0014947
TSKgel Butyl-NPR
2.5 µm
Stainless Steel 4.6 3.5