Ion Exchange Chromatography

离子交换色谱法

东曹生命科学的离子交换色谱柱

东曹生命科学提供各种高效柱供采用离子交换色谱法进行生物分子分析与分离用。针对阴离子和阳离子交换色谱法,产品系列含有甲基丙烯酸酯基质柱和硅胶基质柱,以供蛋白质、肽、DNA及RNA-衍生低核苷酸或其它核酸片段分析用。

聚苯乙烯基离子交换柱可用于分离分析糖类、氨基酸类、核酸基及小分子的候选药物等。

填充无孔硅胶树脂颗粒的亲水性聚合物离子交换柱可供蛋白质、蛋白质多聚体、单克隆抗体电荷同分异构体、聚乙二醇化蛋白质、DNA片段、核酸、低聚糖DNA及siRNA分离用。

特制柱可供离子排斥有机酸(OApak-A 及SCX)和单糖、二糖(Sugar AXI及Sugar AXG)使用。

TSKgel 阴、阳离子交换色谱柱的特征

甲基丙烯酸酯基树脂G5000PW(5PW)是直径为10um球形颗粒,具有约1000Ã孔径。TSKgel 5PW具有二乙氨乙基(DEAE)、磺丙基(SP)或羧甲基(CM)官能团,能分别进行弱阴离子、强阳离子及弱阳离子作用。TSKgel SuperQ-5PW在有效孔径尺寸比TSKgel DEAE-5PW更小的基质上键合了聚胺官能团,形成了高容量的强阴离子交换剂。

TSKgel BioAssist Q柱中的颗粒含有非常大的孔径(~4000Ã),聚胺基团键合在这些颗粒上形成了网状结构。BioAssist Q柱的容量较高,分子量范围较广。TSKgel BioAssist S柱是键合有磺丙基的,具有1300Ã孔隙的颗粒填充的离子交换柱。

甲基丙烯酸酯也是DEAE-NPR、DNA-NPR及SP-NPR等无孔树脂(NPR)柱的主要成分,且这些无孔树脂柱均由粒径为2.5um颗粒填充。高柱效率和低样品容量会限制上述柱在快速分析与微量制备中的应用。因无孔,故NPR柱的蛋白质回收率通常很高。

TSKgel STAT系列无孔树脂柱含有较大颗粒(5、7及10um)。这种相对较大的颗粒键合上新型化合物所形成的柱能够实现快速平衡和分析复杂的生物样品。

 
关于离子交换色谱法

离子交换色谱法(IEC) 是一种通过样品上离子与色谱柱上带相反电荷官能团之间的相互作用力的差异为基础的分离方法。样品离子会与作为盐类加入流动相的抗衡离子争夺官能团。洗脱常常通过不断增加盐浓度的方式来实现。  

离子交换色谱法是蛋白质纯化中最常使用的分离方法。生物分子通常在其表面带有电荷,且电荷的性质会根据溶液pH值而发生变化。 
阴离子交换色谱法 采用含有季铵离子的强阴离子交换柱,或采用具有叔胺或仲胺功能基(如DEAE,即二乙氨乙基)的弱阴离子交换剂。抗衡离子(常为Cl-)维持电中性。 

阴离子交换色谱柱 (类型, 基团):

强阴离子, 甲基丙烯酸:
  • TSKgel BioAssist Q
  • TSKgel SuperQ-5PW
强阴离子, 硅胶:
  • TSKgel QAE-2SW
强阴离子, 聚合物:
  • TSKgel Q-STAT
强阴离子, 聚苯乙烯:
  • TSKgel Sugar AXI
  • TSKgel Sugar AXG
  • TSKgel SAX
 
弱阴离子, 甲基丙烯酸:
  • TSKgel DEAE-5PW
  • TSKgel DEAE-NPR
  • TSKgel DNA-NPR
弱阴离子, 硅胶:
  • TSKgel DEAE-2SW
  • TSKgel DEAE-3SW
弱阴离子, 聚合物:
  • TSKgel DNA-STAT
 
    阳离子交换色谱法 采用含有键合磺酸基(如SP,即磺丙基)的强阳离子交换剂,或采用含有弱酸(如CM,即羧甲基)的弱阳离子交换剂。强离子交换剂相对于弱离子交换剂的优势在于:其具有更宽的pH范围。弱离子交换剂所提供的选择性常常稍微不同于强离子交换剂。

    阳离子交换色谱柱 (类型, 基团):

    强阳离子, 甲基丙烯酸:
    • TSKgel BioAssist S
    • TSKgel SP-5PW
    • TSKgel SP-NPR
    S强阳离子, 硅胶
    • TSKgel SP-2SW
    强阳离子, 聚合物:
    • TSKgel SP-STAT
    强阳离子, 聚苯乙烯:
    • TSKgel SCX
    弱阳离子, 甲基丙烯酸:
    • TSKgel CM-5PW
    • TSKgel OApak-A
    弱阳离子, 硅胶:
    • TSKgel CM-2SW
    • TSKgel CM-3SW
    弱阳离子, 聚合物:
    • TSKgel CM-STAT